2012 год № 2

Оториноларингология

УДК 616.211-002: 616.714/716-001

Н.Н. Цыбиков, Е.В. Егорова, В.И. Пересторонин

Нейромаркеры у больных хроническими гнойными риносинуситами

Читинская государственная медицинская академия, 672090, ул. Горького, 39а, тел.: 8 (3022) 35-43-24, е-mail: pochta@medacadem.chita.ru, г. Чита

Контактная информация: Н.Н. Цыбиков, e-mail: thybikov@mail.ru

Резюме:

Целью настоящего исследования явилось изучение уровня нейроспецифической енолазы, аутоантител к ней и АНТИ-MAG аутоантител в сыворотке крови и назальном секрете здоровых и больных хроническими риносинуситами. Обследовано 60 чел. в возрасте 16 - 45 лет, разделенных на сопоставимые по полу и возрасту группы: здоровые лица - 12 чел.; больные хроническим гнойным риносинуситом - 28 чел.; пациенты с хроническим гнойно-полипозным риносинуситом - 20 чел. Концентрацию нейроспецифической енолазы и АНТИ-MAG антител определяли методом твердофазного ИФА, наборами реактивов "Biomedica" (Германия). Установлено, что у здоровых людей содержание NSE в сыворотке крови составляет 16,08 нг/мл, в назальном секрете - 0,18 нг/мл. Уровень АНТИ-MAG антител составил в сыворотке и назальном секрете 2,55 и 1,15 мкг/мл соответственно.

Ключевые слова:

нейроспецифическая енолаза, миелин-ассоциированный гликопротеин, аутоантитела, хронический гнойный риносинусит, полипозный риносинусит

N.N. Tsibikov, E.V. Egorova, V.I. Perestoronin

Neuromarkers of patients with chronic purulent rhinosinusitis

CSMA, Russia, Chita

Summary:

The purpose of this study was to determine the level of neurospecific enolase, antibodies to it, and anti-MAG antibodies in serum and nasal secretions of healthy men and patients with chronic rhinosinusitis. A total of 60 people aged 16 - 45 years old, distributed in a comparable age and sex groups: healthy subjects - 12 persons, patients with chronic purulent rhinosinusitis - 28 persons and patients with chronic purulent polypous rhinosinusitis - 20 persons. The concentration of neurospecific enolase and anti-MAG antibodies was determined by solid-phase ELISA kits reagents Biomedica (Germany). It was found out that in healthy people the content of NSE in serum was 16.08 ng / ml in nasal secretions - 0.18 ng / ml. The anti-MAG antibodies in the serum was nasal secretions, and 2.55 mg / ml and 1.15 μg / ml, respectively.

Key words:

neurospecific enolaze, myelin-associated glycoprotein, autoantibodies, chronic purulent rhinosinusitis, polypous rhinosinusitis

Введение

Известно, что нейроспецифическая енолаза (NSE) является специфическим маркером повреждения как центральной нервной системы (ЦНС), так и периферической [1]. Согласно другим источникам, NSE в значимых количествах регистрируется в сыворотке крови при злокачественных опухолях, патологии поджелудочной железы, ишемическом инсульте, инфаркте миокарда и экспериментальном зобе [1].

Другим нейромаркером, отражающим степень повреждения ЦНС, является миелин-ассоциированный гликопротеин (MAG). В общем описано 29 белков миелина. Однако при патологии центральной нервной системы наиболее важными являются: основной белок миелина (ОБМ), протеолипидный протеин и MAG, которые в сумме составляют около 80 % всей массы белка нейромаркеров [3]. Они выполняют структурную, стабилизирующую, транспортную функции и обладают выраженными иммуногенными и энцефалитогенными свойствами. Если аутоантитела (Аат) к основному белку миелина были описаны ранее в многочисленных публикациях, то к MAG впервые выявлены при IgG-парапротеинемической нейропатии [2]. Вместе с тем высказано предположение, что одним из путей оттока ликвора являются микроканалы решетчатой кости, откуда он попадает в периневральные пространства обонятельного тракта, а оттуда - в слизистую оболочку полости носа. Этот факт был доказан при изучении распределения и кинетики меченного 131J человеческого сывороточного альбумина, введенного в желудочки мозга новорожденным ягнятам. Причем установлено, что скорость перемещения ликвора в слизистую оболочку носа достигает 1,9 мл/ч [8,9,11]. Аналогичные микроканалы, соединяющие ликворное пространство с лимфатической системой, обнаружены также у человека, обезьяны и других млекопитающих (свиньи, крысы, мыши) [10]. NSE наряду с АНТИ- MAG Аат могут служить критерием патологического состояния слизистой полости носа и околоносовых пазух (ОНП). Это предположение не лишено основания, так как в гнойно-воспалительный процесс полости носа вовлекаются окончания обонятельного нерва, и возможность появления NSE и MAG в назальном секрете - ожидаемое событие. В доступной нам литературе сведений по данному вопросу мы не обнаружили, что и составило предмет нашего исследования.

Цель работы: параллельно исследовать уровень нейроспецифической енолазы, аутоантител к ней и AHTИ-MAG Аат в сыворотке крови и назальном секрете здоровых и больных хроническими риносинуситами.

Материалы и методы

Нами было обследовано 60 чел. в возрасте от 16 до 45 лет, которые были разделены на сопоставимые по полу и возрасту группы:

- здоровые лица (без соматической и ЛОР-патологии) - 12 чел.;

- больные хроническим гнойным риносинуситом (ХГРС) - 28 чел.,

- пациенты с хроническим гнойно-полипозным риносинуситом (ХГПРС) - 20 чел.

Всем исследуемым производили одновременный забор крови и носового секрета. Для получения смывов из полости носа пациенту в каждый общий носовой ход на 10 мин вводили сухой ватный тампон, который после извлечения переносили в пробирку, содержащую 1 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Через 30 мин тампоны тщательно отжимали, и полученный смыв использовали для определения исследуемого вещества [6]. Концентрацию NSE и АНТИ- MAG Аат и уровень аутоантител (аАт) классов IgG в сыворотке крови и sIgA в назальном секрете определяли методом твердофазного ИФА наборами фирмы "Biomedica" (Германия).

Статистическая обработка результатов исследования проводилась с использованием пакета программ Biostat. Учитывая нормальное распределение данных, при сравнении групп использовался парный t-критерий Стьюдента. Различия считали значимыми при р<0,05.

Результаты и обсуждение

Нами установлено (табл. 1), что у здоровых людей в сыворотке крови NSE определяется в количестве 16,08 нг/мл, а в назальном секрете - в пределах 0,18 нг/мл. Как в сыворотке крови, так и назальном секрете нами зарегистрированы аАт различных классов к NSE. Уровень аАт класса Ig G к AHTИ-MAG в сыворотке крови составляет 2,55 мкг/мл , а в назальном секрете - 1,15 мкг/мл.

Таблица 1. Содержание NSE, аутоантител к нему и AHTИ-MAG в сыворотке крови и назальном секрете у здоровых
Параметры	Сыворотка крови	Назальный секрет
NSE (нг/мл)	16,18±1,42	0,1±80,05 Р<0,05
аАт класса Ig G к NSE аАт класса slg А к NSE (ед. опт. пл.)	0,3±0,05 -	0,4±0,06
AHTИ-MAG аАт (нг/мл)	2,5±50,38	1,15±0,34

Примечание. Р - уровень значимости достоверных отличий между сывороткой и назальным секретом.

Возможны два источника NSE и AHTИ-MAG в назальном секрете: транссудация из сыворотки крови и попадание их в составе ликвора, проникающего по периневральным пространствам обонятельного нерва в слизистую полости носа. Последнее представляет определенный интерес в аспекте возможных диагностических перспектив при различной патологии, связанной с повреждением мозга.

Не подлежит никакому сомнению, что зарегистрированные аАт являются мощным механизмом элиминации NSE из жидких сред организма, так как длительное персистирование а/г мозга чревато аутоиммунной патологией.

Вместе с тем, аАт класса Ig G к AHTИ-MAG аАт закономерно обнаруживаются в сыворотке крови доноров. Источником этих нейромаркеров в системном кровотоке являются структуры как центральной, так и периферической нервной системы. Наряду со сказанным, определенный интерес представляет исследование содержания данных веществ у больных хроническим гнойным риносинуситом и хроническим гнойно-полипозным риносинуситом, что определяется возможностью реагирования нервных структур организма на локальный гнойный процесс. Хорошо известно, что доминирующим симптомом при обострении хронического гнойного риносинусита является локальная боль, обусловленная отеком и сдавлением нервных окончаний или действием брадикинина [8]. Афферентный ноцицептивный стимул приводит к постоянному возбуждению различных отделов ЦНС с последующей возможностью формирования "генератора" патологически-усиленного возбуждения и накоплением маркеров повреждения мозга в ликворе и системном кровотоке [4].

Нами показано (табл. 2), что в сыворотке крови у больных хроническим гнойным риносинуситом увеличивается уровень NSE практически в 3 раза, а при хроническом гнойно-полипозном риносинусите - в 5 раз. Наряду с этим, в назальном секрете у больных хроническим гнойным риносинуситом, и особенно при хроническом гнойно-полипозном риносинусите, возрастает содержание NSE. Как уже говорилось ранее, источником енолазы является периневральный ток ликвора, однако не исключен и другой вариант накопления NSE в назальном секрете - транссудация из кровотока через гистогематический барьер. Реальность этого механизма вполне допустима с учетом низкой молекулярной массы енолазы. Наконец, ожидаем и третий источник NSE в назальном секрете, которым могут служить окончания тройничного нерва в слизистой носа и околоносовых пазухах.

Таблица 2. Содержание NSE, аутоантител к нему и AHTИ-MAG в сыворотке крови и назальном секрете у больных хроническими гнойными риносинуситами
Показатель	Здоровые		ХГРС		ХГПРС
Показатель	сыворотка	секрет	сыворотка	секрет	сыворотка	секрет
NSE (пг/мл)	16,18±1,42	0,18±0,005	46,90±7,01	1,49±0,62	83,90±3,53	5,77±1,75
аАт класса Ig G к NSE аАт класса sIg А к NSE (ед. опт. пл.)	0,2±0,01 -	- 0,4±0,01	0,8±0,02 -	- 0,9± 0,03	0,1±0,001 -	- 0,2±0,05
AHTИ-MAG аАт (ед. опт. пл.)	2,5±50,38	1,15±0,34	2,35±0,92	3,06±0,95 р<0,00	2,82±0,83	5,55± 0,7

Нами выявлено, что как в сыворотке крови, так и назальном секрете закономерно регистрируются аАт класса Ig G (в сыворотке крови) и класса slg А (в назальном секрете) у всех исследуемых лиц. Нами показано (табл. 2), что в сыворотке крови у больных хроническим гнойным риносинуситом уровень аАт увеличивается в 4 раза, а у пациентов с хроническим гнойно-полипозным риносинуситом резко снижается. Такая динамика образования аАт не вызывает удивления. Как указано выше, при хроническом гнойном риносинусите увеличивается концентрация NSE в сыворотке крови и, следовательно, интенсифицируется иммунный ответ, что находит отражение в четырехкратном увеличении уровня аАт. Однако у больных хроническим гнойно-полипозным риносинуситом концентрация NSE возрастает еще в большей степени, и при этом происходит снижение уровня аАт в сыворотке крови. Последнее может быть объяснено только лишь образованием иммунных комплексов.

В табл. 2 представлено содержание AHTИ-MAG Аат в сыворотке крови и назальном секрете у больных хроническими риносинуситами. Оказалось, что при хроническом гнойно-полипозном риносинусите возрастает содержание MAG в назальном секрете. Следует отметить, что аналогичная закономерность выявлялась при оценке содержания NSE в назальном секрете. Не исключено, что увеличение концентрации этих нейромаркеров, с одной стороны, свидетельствует о заинтересованности различных структур центральной нервной системы, а с другой стороны, отражает степень повреждения нервных окончаний обонятельного нерва.

Таким образом, при хроническим гнойном риносинусите и хроническом гнойно-полипозном риносинусите, как в сыворотке крови, так и назальном секрете, возрастает концентрация NSE. При хроническом гнойном риносинусите уровень аАт к ним увеличивается, что отражает иммуностимулирующий эффект енолазы, а при хроническом гнойно-полипозном риносинусите - снижается, что указывает на "потребление" аАт в иммунные комплексы.

Литература

1. Гашилова Ф.Ф., Жукова Н.Г. Нейроспецифическая енолаза в сыворотке крови как диагностический маркер паркинсонизма // Бюллетень сибирской медицины. - 2005. - № 3. - С. 28-33.
2. Демина Т.Л., Давыдовская М.В., Хачанова Н.В. и др. Рассеянный склероз: патогенез, диагностика, дифференциальный диагноз и лечение // Неврология. - 2008. - №1.
3. Евтушенко С.К., Деревянко И.Н. Современные подходы к лечению рассеянного склероза: достижения, разочарования, надежды // Международный неврологический журнал. - 2006 - № 2(6). - С. 23-35.
4. Крыжановский Г.Н. Детерминантные структуры в патологии нервной системы. - М.: Медицина, 1980. - 360 с.
5. Лиманский Ю.П. Основные принципы функциональной организации ноцицептивных и антиноцицептивных систем мозга. // Физиол. журн. - 1989. - № 2. - С. 110-210.
6. Смирнова И.Н., Зарипова Т.Н., Кузьменко Д.И. Противовоспалительное действие ингаляций минеральных вод: целесообразность определения биохимических маркеров воспаления в назальном секрете // Вопросы курортологии. - 2003. - № 4. - С. 20-23.
7. Чехонин В.П., Лебедев С.В., Гурина О.И. и др. Элиминация нейроспецифических белков из ЦНС (патогенетические и методические аспекты) // Вестник РАМН. - 2006. - № 6. - С. 3-12.
8. Johnston M.G., Papaiconomou C. The importance of lymphatics in cerebrospinal fluid transport // News Physiol Sci. - 2002. - Vol. 17. -Р. 227-230.
9. Johnston M.G. Evidens of connections between cerebrospinal fluid and lymphatic vessels in humans, non-human primates and mammalian species // Lymphat. Res. Biol. - 2003. - Vol. 1 (I). - Р. 41-44.
10. Johnston M.G.. Cerebrospinal fluid transport: a lymphatic perspective // Cerebrospin. Fluid Res. - 2004. - Vol. 2. - Р. 1-12.
11. Papaiconomou C., Zakharov A., Azizi N. et al. Reassessment of the pathways responsible for cerebrospinal fluid absorption in the neonate // Childs Nerv. Syst. - 2004. - Vol. 20. - Р. 29-36.