2013 год № 2

Акушерство и гинекология

УДК 577.115.3:618.38:616.523

Н.А. Ишутина

Состав полиненасыщенных жирных кислот в крови пуповины при герпес-вирусной инфекции

Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН, 675000, ул. Калинина, 22, тел. 8-(4162)-52-59-57, г. Благовещенск

Контактная информация: Н.А. Ишутина, e-mail: ishutina-na@mail.ru

Резюме:

В статье изучен состав полиненасыщенных жирных кислот и концентрация липид-переносящего белка в крови пуповины новорожденных от матерей, перенесших в различные сроки гестации обострение герпес-вирусной инфекции. Установлено, что при обострении герпес-вирусной инфекции (титр антител IgG к вирусу простого герпеса 1-го типа 1:12800) в период гестации в крови пуповины новорожденных выявлялся дисбаланс полиненасыщенных жирных кислот, характеризующийся снижением кислот ω-3 семейства (эйкозапентаеновой на 34 %, докозагексаеновой на 28 %), при одновременном увеличении содержания провоспалительных предшественников эйкозаноидов кислот ω-6 семейства (линолевой на 51 %, эйкозатриеновой на 57 %, арахидоновой на 12 %). Тем самым, можно полагать, что активация герпес-вирусной инфекции в период беременности подавляет перенос липидов из периферической крови матери через фетоплацентраный барьер, вследствие снижения активности липид-переносящего белка, что является причиной уменьшенной доставки липидов в кровь плода.

Ключевые слова:

герпес-вирусная инфекция, кровь пуповины, полиненасыщенные жирные кислоты, липид-переносящий белок

N.A. Ishutina

Composition of polyunsaturated fatty acids in the blood of the navel in herpes-virus infection contamination

Far Eastern Scientific Center of Respiration Physiology and Pathology of SB RAMS, Blagoveshchensk

Summary:

The article analyzes polyunsaturated fatty acids, and concentration of lipid-bearing protein in blood of navel neonatal from mothers who having had an exacerbation of herpes-virus infection contamination in various terms of gestation. An exacerbation of herpes-virus infection (antiserum capacity IgG to virus of simple herpes 1 1:12800) in the term gestation demonstrated in blood of navel neonatal misbalance of polyunsaturated fatty acids described by drop of acids ω-3 families (eicosapentaenoic on 34%, docosahexaenoic on 28%), at simultaneous augmentation of the contents of proinflammatory precursors of eicosanoic acids ω-6 families (linolic on 51%, eicosatrienoic on 57%, arachidonic on 12%). Thus, it is possible to believe, that activation of herpes-virus infection in pregnancy depresses transmission of lipids from peripheral blood of a mother through fetoplacental barrier, resulting in activity the lipid-bearing protein decrease that is the cause of diminished delivery of lipids to fetal blood.

Key words:

herpes-virus infection, blood of navel, polyunsaturated fatty acids, lipid - bearing protein

Введение

В последние два десятилетия полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК) привлекают повышенное внимание исследователей и врачей в связи с появлением научных данных, указывающих на важность этих соединений для нормального течения беременности и профилактики преждевременных родов, а также для адекватного развития плода и новорожденного ребенка [6]. Одной из важных функций ПНЖК является их участие в качестве субстратов в синтезе биологически активных факторов - эйкозаноидов, которые принимают участие в регуляции иммунного ответа, сосудистого тонуса, состояний микроциркуляции, агрегации тромбоцитов и процессов гемокоагуляции [1]. Ключевым представителем ПНЖК класса ω-6 и основным предшественником синтеза эйкозаноидов является арахидоновая кислота, метаболиты которой выполняют важные регуляторные функции, поскольку в условиях здоровья наиболее значимым является поддержание тонуса мускулатуры, сохранение целостности сосудов, предотвращения кровоточивости при травмах [5]. Чрезмерное же накопление арахидоновой кислоты в организме обеспечивает воспалительный компонент [9].

Кислоты ω-3 семейства эйкозапентаеновая (ЭПК) и докозагексаеновая (ДГК) играют важную роль в пре- и постнатальном формировании и дифференциации функций ЦНС, становлении зрения и слуха ребенка. ДГК является основным компонентом клеточных мембран тканей мозга, фоторецепторов сетчатки глаз, источником образования ω-3 эйкозаноидов, ответственных за физиологические функции [4]. Анализ данных литературы свидетельствуют о том, что, несмотря на количество работ, посвященных исследованию липидного обмена у детей, состав жирных кислот крови пуповины при герпес-вирусной инфекции (ГВИ), остается неизученным.

Цель работы - изучить количественный состав ПНЖК и содержание липид-переносящего белка в крови пуповины новорожденных от матерей, перенесших в период гестации обострение ГВИ с титром антител IgG к вирусу простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1) 1:12800.

Материалы и методы

Проведено исследование ПНЖК крови пуповины у 60 новорожденных. Были выделены следующие группы: контрольная - 30 доношенных новорожденных от практически здоровых матерей; основная - 30 новорожденных от матерей, перенесших в различные сроки гестации обострение ГВИ (титр антител IgG к ВПГ-1 1:12800). В мембранах эритроцитов крови пуповины новорожденных методом газожидкостной хроматографии определяли: ω-3 α-линоленовую (ЛНК), ЭПК, ДГК, ω-6 линолевую (ЛК), эйкозатриеновую (ЭТК), арахидоновую (АК) жирные кислоты. Липиды экстрагировали по Фолчу [10]. Метилирование жирных кислот осуществляли по методу Carren [7]. Обсчет и идентификацию пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса Хроматэк Аналитик 2.5 по временам удерживания с использованием стандартов фирмы "Supelco" (USA). В плазме крови пуповины иммуноферментным методом анализа с помощью наборов "Нbt human H-FABP ELISA" (США) проводили измерение содержания липид-переносящего белка.

Верификацию ВПГ-1 определяли по динамике антител IgG в парных сыворотках с помощью стандартных тест-систем ЗАО "Вектор-Бест" (Новосибирск) на микропланшетном ридере "Stat-Fax 2100" (USA). Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации "Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека" с поправками 2000 г. и "Правилами клинической практики в Российской Федерации", утвержденные Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. № 226. Все участники исследований подписывали протоколы добровольного информированного согласия.

Статистическая обработка данных осуществлялась с помощью "Автоматизированной системы диспансеризации" (правообладатель "ДНЦ ФПД" СО РАМН, 2005 г., версия 2.5). Проверку нормальности распределения проводили по критерию Колмагорова-Смирнова. Анализируемые в статье данные имели нормальное распределение, поэтому проводился расчет средней арифметической (М) и ошибки средней арифметической (m). Проверку гипотезы о статистической значимости различных двух выборок проводили с помощью критерия t-Стьюдента и считали значимыми при p<0,05.

Результаты и обсуждение

При анализе результатов исследования было установлено, что если в период гестации женщина перенесла обострение ГВИ, то состав ПНЖК в крови пуповины изменялся (таблица). Так, содержание ω-3 α-ЛНК в крови пуповины новорожденных имело тенденцию к снижению (p>0,05) при одновременном увеличении концентрации ЛК на 51 % (p<0,01) по сравнению с контролем (таблица). ЛК и α-ЛНК являются первичными субстратами синтеза ω-6 и ω-3 длинноцепочечных ПНЖК. Следовательно, от их содержания зависит выработка АК, ЭПК и ДКГ жирных кислот. В крови новорожденных от матерей с обострением ГВИ содержание ω-3 ЭПК и ДГК снижалось на 34 % и 28 %, соответственно (p<0,05) (таблица). ДГК модулирует функции эйкозаноидов, включаясь в их состав при наличии адекватного соотношения ω-6 и ω-3 ПНЖК. Наряду с ЭПК, ДГК являются конкурентным антагонистами АК. В физиологических условиях данные кислоты конкурируют за циклооксигеназу, что приводит к синтезу ω-3 простагландинов, и за липоксигеназу, с последующим синтезом ω-3 тромбоксана и лейкотриенов с противоположным ω-6 эйкозаноидам свойств, то есть играют роль своеобразного антиоксидантного буфера, который снижает опасность окисления и повреждения ДНК [2]. Поэтому снижения концентрации ω-3 ПНЖК в крови пуповины при ГВИ будет являться неблагоприятным фактором, вследствие уменьшенной выработки провоспалительных эйкозаноидов.

Состав ПНЖК в мембранах эритроцитов и концентрация липид-переносящего белка в плазме крови пуповины при обострении ГВИ
Кислота	Контроль	Основная группа	Р
Линолевая, %	4,30±0,36	6,50±0,33	<0,01
α-Линоленовая, %	0,20±0,07	0,12±0,05	>0,05
Эйкозатриеновая, %	0,51±0,04	0,80±0,07	<0,001
Арахидоновая, %	6,50±0,35	7,30±0,38	<0,01
Эйкозапентаеновая, %	1,24±0,15	0,82±0,12	<0,05
Докозагексаеновая, %	5,25±0,40	3,80±0,39	<0,05
Липид-переносящий белок, нг/мл	2,80±0,15	2,40±0,12	<0,05

Примечание. p - уровень значимости различия между показателями в сравнении с контрольной группой.

При этом концентрация ω-6 ЭТК и АК увеличивалась на 57 % (p<0,001) и 21 % (p<0,01) соответственно (таблица).

Одной из причин изменений обмена ПНЖК, выявленных в крови пуповины при обострении ГВИ могло явиться нарушение активности липид-переносящего белка, концентрация которого снижалось на 14 % (p<0,05), по сравнению с контролем (таблица). Печень плода способна синтезировать жирные кислоты, но все же большинство данных соединений плод получает через плаценту из материнской крови [8, 11]. В тканях плаценты при обострении ГВИ происходят различного рода изменения от компенсаторно-приспособительных до деструктивных процессов [3], оказывающих существенное влияние на снижение функции плаценты, обеспечивающих развитие и жизнеспособность плода, что может быть причиной нарушения транспорта жирных кислот к формирующему плоду.

Таким образом, нарушение целостности тканевых структур плаценты перекисями жирных кислот в условиях обострения ГВИ, способствовало увеличению транспорта через поврежденную наружную мембрану синцитотрофобласта избыточного количества предшественника эйкозаноидов - АК и вероятному отсутствию переноса через внутреннюю мембрану липид-переносящего белка. В результате чего в крови пуповины выявлялся дисбаланс в соотношении ω-6 и ω-3 кислот (с преобладанием ω-6 эйкозаноидов) и снижением содержания эссенциальных ω-3 ЭПК и ДГК, что указывало на их глубокий дефицит и сниженную способность передачи через фетоплацентарный барьер в кровь плода, для создания у него необходимого запаса высокоэнергетических продуктов и оптимальной трофики.

Литература

1. Афонина Г.Б., Куюн Л.А. Липиды, свободные радикалы, иммунный ответ. - Киев : Изд-во НАН, 2000. - 285 с.
2. Конь И.Я., Шилина Н.М., Вольфсон С.Б. Омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты в профилактике и лечении болезней детей и взрослых // Леч. врач. - 2006. - № 4. - С. 55 -59.
3. Луценко М.Т., Андриевская И.А. Состояние фетоплацентарного барьера при герпес-вирусной инфекции у беременных // Бюл. СО РАМН. - 2008. - № 5. - С. 142 -148.
4. Сандуляк Т.В. Липидный статус и нутритивное обеспечение психомоторного развития детей раннего возраста с перинатальной патологией ЦНС. - Режим доступа: http://www.xxivek-zdorov.narod.ru/OptPrim.html. (дата обращения 20.02.2013).
5. Сирота Е. Использование полиненасыщенных жирных кислот омега-3 в профилактике заболеваний. - Режим доступа: http://www.my-nsp.blog.ru/84464211:html?reple=1 (дата обращения 06.03.2013).
6. Шилина Н.М., Конь И.Я. Современные представления о физиологических и метаболических функциях полиненасыщенных жирных кислот // Вопр. дет. диетологии. - 2004. - Т. 2, № 6. - С. 25 -30.
7. Carren J.P., Dubacy J.P-J. Adaptation of a micro-seale metod to the micro-seale for fatty acid methyl trausestenif: cation of biological lipid extracts // Chromatography. - 1978. - № 151. - P. 384 -390.
8. Dutta-Roy A.K. Fetal growth and development: roles of fatty acid transport proteins and nuclear transcription factors in human placenta // In. J. Exp. Biology. - 2004. - Vol. 42, № 8. - P. 747 -757.
9. Elias S.L., Innis S.M. Infant plasma trans, n-6 and n-3 fatty acid and conjugated linolic are related to maternal plasma fatty acid, length of gestation and birth weight and length // Am. J. Clin. Nutrition. - 2001. - № 73. - P. 807 -814.
10. Folch J., Lees M., Sloane G.H. A simple metod for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // Biol. Chemistry. - 1957. - № 26. - P. 497 -509.
11. Larque L., Demmelmair H., Gill-Sanchez A. et al. Placental transfer of fatty acids and fetal implications // Am. J. Clin. Nutrition. - 2011. - Vol. 94, № 6. - P. 190 -191.