2015 год № 4

Инфекционные болезни, иммунология и иммунотерапия

УДК 616.15:612.017]:616.61-002.151.001.8(571.62)

А.Ю. Мартыненко, Г.С. Томилка, Г.Г. Обухова

Динамика цитокинов при геморрагической лихорадке с почечным синдромом

Дальневосточный государственный медицинский университет, 680000, ул. Муравьева-Амурского, 35, тел. 8-(4212)-76-13-96, e-mail: nauka@mail.fesmu.ru, г. Хабаровск

Контактная информация: Г.С. Томилка, e-mail: genntom@mail.fesmu.ru

Резюме:

Определены концентрации провоспалительных цитокинов TNF, IL-2, α-интерферона (α-IFN) и γ-интерферона (γ-IFN) в сыворотке крови 40 больных ГЛПС. Забор крови на исследование проводился в различные периоды болезни у больных с тяжёлым и среднетяжёлым течением заболевания. Выявлено повышение в разгаре ГЛПС в сыворотке крови уровня провоспалительных цитокинов (TNF, IL-2, α-IFN и γ-IFN). Обнаружена достоверная корреляционная связь между уровнями TNF, IL-2, α- и γ-интерферонами в сыворотке крови больных ГЛПС и степенью тяжести течения, а также степенью выраженности острой почечной недостаточности.

Ключевые слова:

геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС), цитокины, клиника, острая почечная недостаточность, сыворотка крови, иммунология, Хабаровский край

A.Y. Martinenko, G.S. Tomilka, G.G. Obukhova

Cytokines dynamics in hemorrhagic fever with renal syndrome

Far Eastern State Medical University, Khabarovsk

Summary:

The authors determined concentration of anti-inflammatory cytokines TNF, IL-2, α-interferon (α-IFN) and γ-interferon (γ-IFN) in blood serum of 40 patients with HFRS. Blood samples were taken at different stages of the disease development in patients with a severe and moderate course of the infection. At the peak of the disease, an increase in anti-inflammatory cytokines (TNF, IL-2, α-IFN and γ-IFN) was revealed. A reliable correlation between the levels of TNF, IL-2, α- and γ-interferons in blood serum of patients with HFRS and the severity of a disease course as well as the degree of acute renal failure was demonstrated.

Key words:

hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS), cytokines, course, acute renal failure, blood serum, immunology, Khabarovsk region

Введение

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) на Дальнем Востоке России характеризуется более тяжёлым течением, чем в других регионах Евразии в связи с циркуляцией на её территории генотипа вируса Hantaan [7, 11]. Многочисленные осложнения, утяжеляющие состояние больных ГЛПС, трудности в диагностике на ранних этапах, которые не позволяют в ряде случаев вовремя назначить этиотропную терапию, малоэффективность при позднем назначении этиотропных препаратов, заставляют исследователей продолжать изучение патогенеза данного заболевания с целью выяснения неизученных факторов влияющих на течение заболевания и совершенствование патогенетической терапии.

Изучение системы цитокинов на сегодняшний день одно из наиболее перспективных и интересных направлений исследования патологических состояний при различных заболеваниях [2, 6], в том числе и инфекционных [1, 3, 4, 8, 9, 12] и ГЛПС [5, 13], так как определение уровней цитокинов позволяет уточнить патогенез заболевания, контролировать эффективность лечения. Несмотря на имеющиеся работы по изучению цитокинов при ГЛПС, сведения, полученные различными исследователями в ряде случаев противоречивы и иногда имеют взаимоисключающую направленность, что не позволяет однозначно высказаться в пользу того или иного мнения. Кроме того, большинство исследований проводилось в регионах, где циркулируют генотипы вирусов, вызывающие более лёгкое течение ГЛПС [7], чем на юге Хабаровского края. Так, например, в Татарстане превалирует лёгкое течение ГЛПС, а тяжёлое зарегистрировано только у 18 % больных [11].

Целью нашей работы явилось исследование динамики статуса провоспалительных цитокинов при тяжёлом и среднетяжёлом течении ГЛПС в различные периоды заболевания для уточнения их роли в патогенезе ГЛПС.

Материалы и методы

Для определения провоспалительных цитокинов TNF, IL-2, α-интерферона (α-IFN) и γ-интерферона (γ-IFN) в сыворотке крови 40 больных ГЛПС мы использовали тест системы "Вектор-Бест" (чувствительность 10 пг/мл). Заболевание протекало в тяжелой форме у 18 больных и в среднетяжёлой форме у 22 больных. В контрольную группу входили 15 здоровых человек. Содержание цитокинов в контрольной группе составила TNF - 5,79±0,84 пг/л, IL-2 - 9,64±1,39 пг/л, α-IFN - 15,04±3,05пг/л и γ-IFN -13,96±2,54 пг/л. Возраст заболевших колебался от 18 до 56 лет и в среднем составил 34,57±2,31 года. У всех больных диагноз был подтверждён серологическим методом (МФА) специалистами Хабаровской противочумной станции. Степень тяжести ГЛПС оценивалась с помощью разработанных нами оценочных таблиц [10]. Для разделения течения болезни на периоды, мы использовали периодизацию ГЛПС по Шапиро С.Е. и Ковальскому Г.С. [7], которые выделяли периоды лихорадочный, ранней апирексии, ранней реконвалесценции и поздней реконвалесценции. Учитывая тот факт, что подавляющее количество больных госпитализировалось на 5-8-й день от начала заболевания (конец лихорадочного - начало периода ранней апирексии), мы объединили полученные в этом периоде показатели в один период - разгара заболевания (II период - рис. 1-4). Периоды ранней и поздней реконвалесценции отмечены на рисунках как III и IV период соответственно.

Рис. 1. Динамика IL-2 по периодам ГЛПС в зависимости от степени тяжести

Рис. 2. Динамика TNF по периодам ГЛПС в зависимости от степени тяжести

Рис. 3. Динамика α-IFN по периодам ГЛПС в зависимости от степени тяжести

Рис. 4. Динамика γ-IFN по периодам ГЛПС в зависимости от степени тяжести

Результаты и обсуждение

При тяжелом течении ГЛПС отмечалось достоверное (р<0,05) увеличение в 2-2,5 раза уровня интерлейкина-2 (16,58±1,66 пг/л) в периоде разгара заболевания, с последующим небольшим снижением в периоды ранней и поздней реконвалесценции (III и IV периоды соответственно), однако с сохранением достоверного (р<0,05) различия относительно контроля.

При среднетяжёлом течении заболевания уровень интерлейкина-2 был достоверно (р<0,05) повышен на всём протяжении болезни, возрастая в периоде поздней реконвалесценции (15,72±2,29 пг/л) (рис. 1, таблица).

Таблица. Динамика показателей провоспалительных цитокинов по периодам в зависимости от степени тяжести течения ГЛПС, (пг/мл)
Показатель	Контроль	Тяжесть	2-й период	3-й период	4-й период
TNF	5,79±0,84	Т	11,0±1,30*	8,68±2,4	5,73±1,03
TNF	5,79±0,84	С	8,32±1,35	7,16±1,19	7,08±1,61
IL-2	9,64±1,39	Т	16,58±1,66*	15,84±2,39*	11,73±1,96*
IL-2	9,64±1,39	С	16,77±1,80*	14,30±1,52	15,72±2,29
α-интерферон	15,04±3,05	Т	30,13±3,69*	25,78±6,1	14,5±4,68
α-интерферон	15,04±3,05	С	21,75±3,41	21,71±3,87	29,0±4,68*
γ-интерферон	13,96±2,54	Т	29,03±4,19*	26,64±6,52	17,89±3,99
γ-интерферон	13,96±2,54	С	19,41±3,74	22,68±4,45	25,74±5,77

Примечание. * - достоверное (р<0,05) различие показателей тяжёлой среднетяжёлой форм ГЛПС в сравнении с контролем.

Концентрация TNF у больных тяжёлой и среднетяжёлой формой ГЛПС в периоде разгара заболевания (11,0±1,30 пг/л и 8,32±1,35 пг/л) была достоверно (р<0,05) выше в 1,5-2 раза в сравнении с контрольными величинами. В последующие периоды, при тяжёлом течении заболевания отмечалось значительное снижение уровня TNF, при этом показатели практически не отличались от нормальных величин. Такая же динамика отмечалась и в периоде поздней реконвалесценции.

Иная картина наблюдалась при среднетяжёлой степени тяжести ГЛПС. В периоде ранней реконвалесценции и поздней реконвалесценции содержание TNF было выше, чем у контрольной группы (рис. 2, таблица).

При тяжелом течении ГЛПС отмечалось достоверное увеличение в 2 раза в сравнении с контролем уровня α-интерферона (30,13±3,69 пг/л) в периоде разгара заболевания, с последующим некоторым снижением в периоды ранней реконвалесценции и достоверным падением ниже контрольных величин в периоде поздней реконвалесценции.

При среднетяжёлом течении заболевания уровень α-интерферона был недостоверно повышен в периоде разгара и в периоде ранней реконвалесценции в сравнении с контролем. Следует отметить, что в периоде поздней реконвалесценции отмечался достоверный подъем (в 2,5 раза выше контрольных величин) концентрации α-интерферона (29,0±4,68 пг/л) (рис. 3, таблица).

Практически идентичная динамика отмечалась и у γ-интерферона. С той только разницей, что при тяжёлом течении уровень γ-интерферона в периоде поздней реконвалесценции не снижался ниже контрольных величин, но достоверно от них не отличался (рис. 4, таблица).

Проведённый корреляционный анализ уровня цитокинов со степенью тяжести течения ГЛПС и содержанием креатинина в сыворотке крови, который является одним из важнейших маркёров выраженности острой почечной недостаточности (ОПН) показал достоверную среднюю положительную корреляционную связь между уровнем в сыворотке крови TNF (+0,4505±0,0112), α- (+0,3874±0,0248), и γ- (+0,3421±0,0146) интерферонов и степенью тяжести ГЛПС. Схожая картина корреляционной связи отмечалась при сравнении уровня TNF (+0,4937±0,0198), α- (+0,4123±0,0328), γ- (+0,3698±0,0564) интерферонов с уровнем креатинина в крови.

Таким образом, представленные данные свидетельствуют о важной роли провоспалительных цитокинов в патогенезе ГЛПС, в том числе в развитии ОПН.

Выводы

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом сопровождается повышением в сыворотке крови уровня провоспалительных цитокинов (TNF, IL-2, α-IFN и γ-IFN).
Достоверная корреляционная связь между уровнями TNF, IL-2, α- и γ-интерферонами в сыворотке крови больных ГЛПС и степенью тяжести течения, а так же степенью выраженности острой почечной недостаточности свидетельствует о важной роли провоспалительных цитокинов в патогенезе ГЛПС и позволяет использовать эти показатели для оценки тяжести заболевания и прогноза дальнейшего течения болезни.

Литература

1. Бургасова О.А., Усков А.Н., Гринченко Н.Е., Ценёва Г.Я. Особенности содержания цитокинов в сыворотке крови больных иксодовым клещевым боррелиозом с различными клиническими проявлениями // Микробиология, эпидемиология и иммунология. - 2010. - № 3. - С. 67-71.
2. Гребенюк В.В., Юсан Н.В., Игнатьев В.Г., Яновой В.В., Сысолятин А.А. Способ определения степени тяжести состояния больных с абдоминальным сепсисом // Дальневосточный медицинский журнал. - 2010. - № 1. - С. 40-42.
3. Гюлазян Н.М., Белая О.Ф., Юдина Ю.В., Пак С.Г. Особенности профиля про- и противовоспалительных цитокинов при некоторых острых кишечных инфекциях // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2008. - № 1. - С. 22-26.
4. Железникова Г.Ф., Волохова О.А. Salmonella enterica и система цитокинов хозяина: Микробиология, эпидемиология и иммунология, 2009. - № 5. - С. 98-104.
5. Иванис В.А. Современные представления о патогенезе Хантавирусной инфекции // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2008. - № 2. - С. 15-19.
6. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. - СПб: ООО "Издательство Фолиант", 2008. - 552 с.
7. Ковальский Г.С. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом. - Хабаровск, 1998. - 67 с.
8. Мурзабаева Р.Т. Система интерферона и иммунный статус у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом: автореф. дис. … д-ра мед. наук. - 2003. - 47 с.
9. Рычкова О.А., Скрипченко Н.В., Кашуба Э.А. Дисфункция иммунной системы в патогенезе развития осложнений менингококковой инфекции у детей // Инфекционные болезни. - 2009. - Т. 7, № 2. - С. 32-37.
10. Сидельников Ю.Н., Мартыненко А.Ю. Метод оценки тяжести течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом и его прогностическое значение // Дальневосточный медицинский журнал. - 2003. - № 4. - С. 23-26.
11. Слонова Р.А., Ткаченко Е.А., Иванис В.А. и соавт. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (современные аспекты экологии, этиологии, эпидемиологии, иммунопатогенеза, диагностики, клиники и лечения). - Владивосток: ОАО "Примполиграфкомбинат". - 2006. - 246 с.
12. Тагирова З.Г., Ахмедов Д.Р., Амирова Д.М. Показатели провоспалительных цитокинов у больных шигеллёзами // Инфекционные болезни. - 2010. - Т. 8, № 1. - С. 55-57.
13. Ющук Н.Д., Валишин Д.А., Сахаутдинова Г.В., Сибиряк С.В. Динамика цитокинов у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом // Эпидемиология и инфекц. болезни. - 1999. - № 4. - С. 36-37.