Поиск статьи 
  Авторам  
  О журнале  
 Архив номеров 
 Свежий номер 
ISSN 1994-5191
Дальневосточный медицинский журнал
Дальневосточный медицинский журнал
Ежеквартальное научно-практическое издание

2022 год № 4

Клиническая медицина


DOI:10.35177/1994-5191-2022-4-3
УДК 618.4:576.35]-053.31
Александр Александрович Кулик1, Ольга Валентиновна Лемещенко2, Марина Федоровна Рзянкина3, Наталья Юрьевна Якушева4
Оценка уровня оксидативного стресса у новорожденных в зависимости от методов родоразрешения
1-4Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск, Россия
1akul1k@yandex.ru
2cian_bloodbane@mail.ru
3rzyankina@mail.ru
4whiteout@mail.ru
Аннотация:
В статье представлен сравнительный анализ определения наличия и уровня свободных радикалов, взятых из проб пуповинной крови (сыворотки) новорожденных, в зависимости от метода родоразрешения, а именно: самопроизвольные (нормальные) роды, самопроизвольные (патологические/осложнённые) роды, плановая операция кесарева сечения (ПОКС), экстренная операция кесарева сечения (ЭОКС), с целью дальнейшего статистического анализа полученных результатов. Для цитирования: Оценка уровня оксидативного стресса у новорожденных в зависимости от методов родоразрешения / А.А. Кулик, О.В. Лемещенко, М.Ф. Рзянкина и др. // Дальневосточный медицинский журнал. - 2022. - № 4. - С. 14-17. http://dx.doi.org/10.35177/1994-5191-2022-4-3.
Ключевые слова:
роды, родильный дом, родовспоможение, оксидативный стресс (ОС), операция кесарева сечения (ОКС), свободные радикалы, хемилюминисценция (ХМЛ), активные формы кислорода (АФК

Alexander A. Kulik1, Olga V. Lemeshchenko2, Marina F. Rzyankina3, Natalia Yu. Yakusheva4
Assessment of the level of oxidative stress in newborns depending on the methods of delivery

1-4Far Eastern State Medical University, Khabarovsk, Russia 1akul1k@yandex.ru
2cian_bloodbane@mail.ru
3rzyankina@mail.ru
4whiteout@mail.ru
Abstract:
The article presents a comparative analysis determining the presence and level of free radicals taken from the samples of umbilical cord blood (serum) of newborns, depending on the method of delivery, namely: spontaneous (normal) childbirth, spontaneous (pathological/complicated) childbirth, planned cesarean section, emergency cesarean section. The study was aimed at conducting further statistical analysis of the obtained results. For citation: Assessment of the level of oxidative stress in newborns depending on the methods of delivery / A.A. Kulik, O.V. Lemeshchenko, M.F. Rzyankina, et al. // Far Eastern medical journal. - 2022. - № 4. - P. 14-17. http://dx.doi.org/10.35177/1994-5191-2022-4-3.
Key words:
childbirth, maternity hospital, obstetric care, oxidative stress, Cesarean section, free radicals, reactive oxygen forms
Введение

Абдоминальное родоразрешение не улучшает здоровье ребёнка. Новорожденный для подготовки к внеутробной жизни проходит процесс созревания в родах. У детей, моментально перемещённых из одних условий в другие, снижены адаптационные процессы, а именно это выражается в респираторных расстройствах. При родоразрешении путём ОКС нет механической подготовки расправлению альвеол за счёт удаления лишней жидкости, помимо этого не происходит обсеменения материнской микробиотой [1]. Общая и регионарная анестезия, как и хирургическая травма, могут оказывать воздействие на метаболизм кислорода за счет изменения состава дыхательной смеси, афферентных, соматических и вегетативных нервных стимулов с места повреждения. Особое значение имеют и химические вещества, используемые для анестезии. Эти изменения вызывают как местную, так и общую реакцию организма, сопровождающуюся увеличением содержания АФК и снижением антиоксидантной активности. К сожалению, и до настоящего времени роль ОС у детей, рожденных путем ОКС, в литературе отражена недостаточно. Вышеизложенное обосновывает актуальность и значимость данных исследований. Большое число наблюдений, посвященных проблемам изучения клинических особенностей и диагностики гипоксии, к сожалению, не позволяет разработать критерии прогноза реализации гипоксии плода в гипоксическое повреждение у новорожденного [6, 8, 9, 10]. Таким образом, это обосновывает актуальность и необходимость исследований, направленных на углубление изучение патогенеза развития гипоксии у плода и новорожденного.

ОС - результат нарушения гармонии между продукцией повреждающих АФК и других окисляющих молекул и возможностями антиоксидантной защиты организма [1, 4]. Это состояние, характеризующееся повышенными уровнями внутриклеточных АФК, которые включают супероксидный радикал (О2-), перекись водорода (Н2О2), гидроксильные (свободные) радикалы (О-), синглетные формы кислорода (1 О2), ионы НО2- , которые способны к реакциям, приводящим к разрушению ДНК, белков и липидов [4, 6, 9]. Клетка в процессе жизнедеятельности продуцирует АФК, которые в норме инактивируются ферментами антиоксидантной системы (АОС). АФК могут вызывать деструкцию мембран и повреждение клеток. Несмотря на противодействие со стороны АОС, гиперпродукция АФК может вести к гибели клеток путем апоптоза или некроза. Повреждающий эффект АФК может затрагивать различные органы и влиять на каскад внутри- и внеклеточных сигналов, оказывая воздействие на состояние ангиогенно-воспалительного стресса, послеоперационную боль и процессы репарации после хирургической операции.

Достоверно неизвестно, что у детей запуск процессов ОС начинается сразу после рождения, а в случаях патологических состояний, нарушающих течение беременности и родов, и внутриутробно.

Значимость понимания механизма баланса между биологическим окислением и антиоксидантной защитой для новорожденных характеризуется тем, что рождение представляет собой значительный ОС для плода, который переходит из внутриутробного гипоксического окружения (парциальное напряжение кислорода в крови в пределах 20-30 мм рт. ст.) в нормооксическое окружение (парциальное напряжение кислорода около 70-100 мм рт. ст.). Новорожденные дети подвержены повышенному риску оксидативного повреждения ввиду существующего у них дисбаланса антиоксидантов и прооксидантов, ведущего к поражению тканей [1, 3]. Поэтому данная проблема требует дальнейшего научного поиска.

Цель - на основании определения уровня свободных радикалов провести сравнительный анализ их содержания в пробах пуповинной крови в зависимости от вида родоразрешения.

 
Материалы и методы

Забор пуповинной крови осуществлялся на базе КГБУЗ "Родильный дом № 4" с оформлением добровольного информированного согласия на медицинское вмешательство. Далее проводилось исследование ХМЛ 124 проб сыворотки крови для определения спонтанной и индуцированной реакции под действием Fe2+ (Sf) и Н2О2 в присутствии люминола (Sh). Регистрация ХМЛ осуществлялась на люминесцентном спектрометре LS 50B "PERKIN ELMER".

Исследование спонтанной и индуцированной Fe2+ ХМЛ проводилось путем определения светосуммы за 1 минуту спонтанной ХМЛ (Sfспонт.), величина которой коррелирует с интенсивностью генерации активных кислородных метаболитов; максимума быстрой вспышки (h) индуцированной Fe2+ ХМЛ, свидетельствующий о содержании гидроперекисей липидов; светосуммы (Sfинд) за 2 минуты после "быстрой" вспышки, отражающую скорость накопления перекисных радикалов липидной природы.

Анализ кинетики ХМЛ, индуцированной Н2О2 в присутствии люминола определялся на основании светосуммы за 1 минуту спонтанной ХМЛ в присутствии люминола (Slum), свидетельствующей об интенсивности образования гидроксил-радикалов; максимума свечения после введения Н2О2 (H), указывающего на потенциальную способность биологического объекта к перекисному окислению; светосуммы за 2 минуты индуцированной Н2О2 ХМЛ (Shинд), величина которой обратно пропорциональна активности антиоксидантной антирадикальной защиты [2].

В группу включения входили беременные женщины со сроком гестации 37 полных недель до 41 недели и 6 дней. Таким образом, группу исключения составили женщины с недоношенным и с переношенным сроком гестации. В ходе исследования были выделены 4 группы женщин с учетом методов родоразрешения: самопроизвольные нормальные роды, самопроизвольные патологические роды, ПОКС, ЭОКС.

В ходе исследования применялись информационно-аналитический, статистический и методы сравнительного анализа.

Исследование проводилось с использованием пакета прикладных программ MS Office 2019 и Statistica 10.0. Проводился расчет и анализ относительных и средних величин и их ошибок, оценка достоверности разности показателей параметрическими и непараметрическими методами (при малом числе наблюдений в группах и сомнениях в нормальности распределения). Показатели считались достоверными при р<0,05.

 
Результаты и обсуждение

Нами был проведён забор образцов сыворотки пуповинной крови в количестве 124 проб на базе РД-4 для определения наличия и уровня свободных радикалов, в зависимости от метода родоразрешения (таблица). Были сформированы 4 варианта исследуемых сывороток в зависимости от метода родоразрешения, а именно: самопроизвольные нормальные роды, самопроизвольные патологические роды, ПОКС, ЭОКС.

Таблица - Наличие свободных радикалов в сыворотке пуповинной крови
Тип родоразрешенияSfSh
h, M±mSfинд, M±mSспонт. , M±mН,;M±mSfинд, M±mSlum, M±m
 Роды самопроизвольные0,006±0,0010,010±0,0010,004±0,0010,005±0,0010,007±0,0010,005±0,001
 Роды осложнённые0,008±0,0010,010±0,0030,013±0,0010,014±0,0010,013±0,0010,010±0,003
 ПОКС0,015±0,0010,041±0,0050,013±0,0010,023±0,0020,061±0,0020,023±0,004
 ЭОКС0,013±0,0010,129±0,0160,014±0,0010,060±0,0040,024±0,0020,013±0,001

Анализ изменения показателей Sf позволил отметить изменение всех анализируемых параметров в зависимости от типа родоразрешения (р<0,05). Так, h колебался от 0,006±0,001 до 0,015±0,001, достигая своего пика при ПОКС, что незначительно отличалось от ЭОКС (0,013±0,001) (р>0,05), но был достоверно выше, чем при родах естественным путем, как самопроизвольных (р<0,01), так и осложненных (р<0,01). Sfинд при естественном родоразрешении находился на одном уровне (0,010±0,001), в то время, как при ПОКС он был в 4 раза выше (0,041±0,005) (р<0,01), а при ЭОКС значительно превышал все предыдущие показатели (0,129±0,016) (р<0,01). В то же время, Sспонт значительно отличался только при самопроизвольных родах (0,004±0,001), при которых он был более, чем в 4 раза ниже, чем при остальных видах родоразрешения (0,013±0,001) (р<0,01).

Аналогичная ситуация наблюдалась при анализе Sh. Уровень H изменялся в зависимости от типа родоразрешения, достоверно возрастая при ОКС (р<0,01) и более, чем в 2,5 раза превышая в экстренных случаях плановые показатели как при родоразрешении через естественные родовые пути, так и при ОКС (р<0,01). При оценке Sfинд и Slum следует отметить достоверно более высокие показатели при ОКС, чем при родах (р<0,01) с преобладанием значений в 1,8-2,5 раза при плановых операциях (р<0,01).

Данный анализ может свидетельствовать о взаимосвязи метода родоразрешения с уровнем свободных радикалов в сыворотке крови и, соответственно, ОС. Даже в группе женщин, родивших через естественные родовые пути, при нормальном течении родов, присутствуют АФК. Так же видно, что при решении вопроса о родоразрешении методом операции кесарева сечения в плановом порядке по показаниям как со стороны матери, так и плода, уровень ОС выше, чем при самопроизвольных патологических родах. В группе женщин, родоразрешённых методом ЭОКС, в случае когда не было условий для экстренного родоразрешения через естественные родовые пути, уровень АФК и ОС был в разы больше чем в других группах и составил максимальное значение.

Таким образом, можно предположить о большем негативном влиянии такого метода родоразрешения, как ОКС среди других методов.

 
Выводы

1. Сравнительный анализ уровня и наличия свободных радикалов в пробах пуповинной крови методом ХМЛ показал достоверное увеличение показателей Sf и Sh в зависимости от метода родоразрешения (р<0,01). При всех видах родоразрешения, в том числе, при нормальных срочных родах, отмечено наличие АФК с достоверным увеличением Sf и Sh при осложненных родах (р<0,05) и при ОКС (р<0,01).

2. При изменении метода родоразрешения и условий, например, самопроизвольные патологические роды или плановая ОКС, уровень АФК в сыворотке пуповинной крови повышается, что свидетельствует об увеличении влияния ОС на организм новорождённого.

 
Список источников
 
  1. 1. Акушерская агрессия, v 2.0. / В.Е. Радзинский. - М.: Изд-во журнала Status Praesens, 2017. - С. 563, 570, 573, илл.
  2. 2. Арутюнян А. В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма: методические рекомендации. - СПБ.: Наука, 2000. - 198 с.
  3. 3. Лебедько О.А., Тимошин С.С. Активные кислородные метаболиты как универсальные мессенджеры процессов сигнальной трансдукции // Дальневосточный медицинский журнал. - 2004. - № 4. - С. 95-98.
  4. 4. Мокрецова Е.В., Томилка Г.С., Лебедько О.А., Ковальский Ю.Г., Якушева Н.Ю., Щупак А.Ю., Малеев В.В. Состояние оксидативного статуса у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. Heilongjiangensis, выявленных на юге Хабаровского края // Дальневосточный медицинский журнал. - 2021. - № 4. - С. 20-23.
  5. 5. Anup R., Aparna V., Pulimood A., Balasubramanian K. Surgical stress and the small intestine: role of oxygen free radicals. Surgery. - 1999. - № 125. - С. 560-569.
  6. 6. Buonocore G., Perrone S. // Heamatol. Rep. - 2006. - Vol. 2, № 10. - P. 103-107.
  7. 7. Hjelt K., Lung J.T., Scherling B. // Acta Paediatr. -1995. - Vol. 84, № 4. - P. 365-370.
  8. 8. Linderkamp O. // Baillieres Clin. Haematol. - 1987. - Vol. 1, № 3. - P. 801-825.
  9. 9. Merenstein G.B. Handbook of Neonatal Intensive Care / G.B. Merenstein, S.L. Gardner. - 6th ed. - St.Louis: Mosby Inc., 2006. - 1040 p.
  10. 10. Mishra O.P., Delivoria-Papadopoulos M. // Brain Res. Bull. - 1999. - Vol. 48. - P. 233-238.